Agilent 1290超高效液相色谱仪的操作流程主要包括以下步骤：

1. 开机准备：首先启动计算机并登录Windows系统；依次打开Agilent 1290各模块（如泵、自动进样器、柱温箱、检测器等）电源，待各模块自检完成（指示灯呈黄色或无色）后，双击桌面【1290 InfinityⅡ（online）】启动工作站软件。

2. 系统设置：右键点击泵模块下的溶剂瓶图标，输入溶剂实际体积及瓶体积（可设置停泵体积）；通过“视图”菜单调用“方法和运行控制”“系统视图”“在线信号”等界面，配置需监测的信号窗口。

3. 排气操作：在方法编辑中选择需排空的泵通道，通过泵控制界面勾选“吹扫”功能，设置流速、时间及比例排空管道；若泵头气泡难排，可选择“预备-开”模式，泵会自动强力排液20次。

4. 方法编辑：

   • 泵参数：设置流量（0.1~5.0ml/min，常用0.2~0.4ml/min）、流动相比例（如溶剂B百分比）、压力限（建议低于色谱柱耐受压力的90%）、停止时间及后运行时间（梯度洗脱需协调后运行时间）；
   • 自动进样器：选择进样方式（标准进样或洗针进样），设置进样量（0.1~20ul）；
   • 柱温箱：设置左右一致的温度（如40℃）；
   • 检测器（如DAD）：设置检测波长（选最大吸收波长）、带宽、参比波长及带宽，调整峰宽（响应时间）匹配目标峰宽。

5. 运行与关机：完成方法设置后运行样品；实验结束需用95%水+5%甲醇冲洗色谱柱30~60分钟，再用纯甲醇冲洗至基线平稳；关闭泵、进样器等模块，退出软件并关闭各模块电源。

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