高效液相色谱仪在化学分析领域应用广泛，Agilent 作为知名品牌，其仪器在使用过程中有诸多需要注意的事项。以下是一些重要的注意事项： 仪器开机前： - 环境要求：仪器应放置在稳定的实验台上，远离震动源、强磁场和电场，避免阳光直射。同时，要确保环境温度在 20-25℃之间，相对湿度在 40%-60%之间。 - 流动相准备：流动相的纯度要求极高，必须使用高纯度的试剂，如色谱纯的有机溶剂和超纯水。在使用前，需要对流动相进行过滤和脱气处理，以去除其中的微小颗粒杂质和溶解气体。此外，不同的分析方法可能需要不同比例和种类的流动相，在配制流动相时，要严格按照实验要求进行准确配制。 仪器开机与初始化： - 开机顺序：首先开启仪器的电源开关，然后按照仪器操作手册的要求，依次开启各个组件的电源，如泵、检测器等。在开机过程中，要密切观察仪器的状态指示灯和显示屏上的提示信息，确保仪器各部件正常启动。 - 初始化设置：开机完成后，需要对仪器进行初始化设置，包括流动相流速、压力限制、检测波长等参数的设定。这些参数的设置要根据具体的分析方法和样品要求进行准确调整。同时，要对仪器的进样系统进行初始化设置，包括进样量、进样模式等。 样品分析过程： - 进样操作：如果采用手动进样，进样前要确保进样针干净、无残留杂质。将进样针用流动相冲洗数次，然后吸取适量的样品溶液。进样时，要快速、准确地将样品注入进样口，避免进样过程中出现气泡或样品损失。对于自动进样器，要按照仪器操作说明将样品瓶正确放置在进样盘中，并设置好进样顺序和进样量等参数。在进样过程中，要注意观察自动进样器的运行状态，确保进样操作准确无误。进样后，要及时对进样针或进样系统进行清洗，防止残留的样品对后续分析产生干扰。 - 色谱柱的使用与维护：选择合适的色谱柱对于样品的分离至关重要。要根据样品的性质、分析目的和流动相的组成等因素选择合适类型和规格的色谱柱。在使用色谱柱时，要注意控制流动相的流速和压力，避免过高的流速和压力对色谱柱造成损坏。同时，要确保流动相的组成和 pH 值在色谱柱的耐受范围内。分析过程中要密切观察色谱柱的柱效和分离效果。如果发现柱效下降、峰形展宽或分离度降低等情况，可能是色谱柱受到污染或损坏，需要及时进行处理。可以采用适当的冲洗方法对色谱柱进行清洗，但要注意冲洗的时间和流速，避免对色谱柱造成不可逆的损伤。色谱柱在不使用时，要妥善保存。一般用适当的溶剂将色谱柱冲洗干净，然后密封保存，防止色谱柱干涸或受到污染。 - 检测与数据记录：在样品分析过程中，要密切观察检测器的信号变化，确保基线稳定、信号正常。如果出现基线漂移、噪声过大等问题，要及时排查原因并进行处理。准确记录分析数据，包括保留时间、峰面积、峰高、分离度等参数。这些数据是分析结果的重要依据，要确保记录的准确性和完整性。对分析结果进行质量控制，例如进行重复性实验，确保分析结果的可靠性和准确性。 仪器关机与维护： - 关机步骤：分析结束后，首先停止进样，然后用适当的溶剂冲洗色谱柱和流动相系统，以去除残留的样品和杂质。按照仪器操作手册的要求，依次关闭各个组件的电源，如检测器、泵等，最后关闭仪器的总电源开关。 - 日常维护：定期对仪器进行清洁，包括仪器表面、进样口、检测器等部位。定期检查仪器的各个部件，如泵的密封圈、管路连接等，确保无泄漏现象。定期对仪器进行校准和性能检测，确保仪器的各项性能指标符合要求。妥善保存仪器的操作手册、维护记录等资料，以便在需要时查阅和参考。 我们公司匠析生物提供实验仪器、耗材、备件及售后维修维保整体解决方案，涵盖 Thermofisher、Waters、Agilent、GE、Cytiva、Beckman 等品牌。包括维修、租赁、清灰保养等服务，拥有色谱、质谱、光谱、蛋白层析系统、毛细管电泳仪等仪器及配件、耗材，还有色谱应用咨询。如果您在使用高效液相色谱仪的过程中遇到任何问题，欢迎随时联系我们，我们将为您提供专业的技术支持和优质的服务。