Agilent 1260液相色谱仪的使用方法如下:
一、开机前准备
根据实验要求配制流动相,须经0.45μm滤膜过滤,之后再进行脱气处理,使用前必须用超声波振荡10 - 15min,按无机相和有机相分开装入溶剂瓶A(装有洗盐装置,最好固定盛放无机盐水相)、B中;对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2~3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal - wash,以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。
二、开机与模块自检
打开计算机,进入Windows系统,从上到下依次打开各模块电源。待各模块自检完成后,双击桌面上的“仪器1联机”图标,将自动进入化学工作站画面。从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项,进入方法和运行控制窗口。
三、排气与冲洗色谱柱
- 打开Purge阀(逆时针),右击“泵”图标出现参数设定菜单,单击“设定泵”选项进入泵编辑画面,设“流量”逐步增大流速至5ml/min,A通道设到100%,单击“确定”。
- 单击“泵”图标,出现参数设定菜单,单击“泵控制“选项选中“开”,单击“确定”则系统开始Purge,直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止;切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止(查看柱前压力,若大于10Bar,则应更换排气阀内滤芯/过滤白头)。
- 将泵的流量设到0.5ml/min,若使用双泵则应设定溶剂配比,如A = 80%,B = 20%;关闭排气阀(顺时针),再将流量设到0.8ml/min,2分钟后设定至方法所需流速,冲洗色谱柱20 - 30min。
四、编辑方法
- 点击“Method”—— “Edit Entire Method”开始编辑完整方法,选中除“Data Analysis ”外的三项,进入下一选项卡,选择“Als”(自动进样),点击“OK”,进入下一选项。
- 进行泵参数、自动进样器参数、柱温箱参数、UV检测器参数等设定,编辑方法完毕,从“Method”菜单中,选中“Save Method As”,输入一方法名,选择“OK”,保存方法成功。
五、样品分析
- 单针进样:从“Run Control”菜单中,选择“Sample Information”选项,输入“Operator Name”;在“Data File”中选择“Path”和 “Prefix/Counter(文件命名)”,设置“Prefix(一般设置为年月日)”和“Counter”;输入“Location(样品位置)”和“Sample Name”,选择“OK”,基线平稳后选择“Run Control”中的“Run Method”选项,开始进样。
- 序列进样:选择“Sequence”菜单下“ Sequence Table”选项,在“Configure Table”中选择需要选项,一般为“Vial(样品瓶)”,“Sample Name(样品名称)”,“Method Name(方法名称)”,“Inj/Vial(进样次数)”等,设置完成后运行序列。
六、数据分析与关机
分析完成后,使用自带的软件进行数据处理,生成图表和报告。关机时按照仪器操作要求逐步关闭各模块及计算机。
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