aktapure蛋白纯化仪的操作流程如下:
- 硬件检查:确认USB连接线连接良好,电源线插入电源插座,废液管放置在废液缸中。
- 开机:打开AKTApure电源,待控制面板上的Power灯稳定后打开电脑,双击UNICORN软件图标,选择用户并输入密码(如有设置)进入软件,打开System Control窗口并连接系统。
- 实验前准备:
- 缓冲液准备:所有层析用缓冲液及样品需用0.22μm滤膜过滤,并进行脱气处理(如超声波脱气或负压脱气)。
- 泵头抽气:若缓冲液进口管有空或气泡,在泵头抽气螺母上连接注射器,拧松螺母抽气以排除泵头内气泡。
- 泵冲洗:将缓冲液进口管从保护液转移到相应缓冲液瓶中(高盐缓冲液建议先用水冲洗),在System Control界面执行泵冲洗操作。
- 安装柱子:选择柱子连接位置和溶液流向,设置较小流速和柱压报警值,连接柱子并确保无气泡。
- 层析实验操作:
- 平衡:设置高压报警值、平衡流速和检测波长,执行命令对层析柱进行平衡(一般5 - 10个柱床体积),平衡完成后进行紫外调零。
- 上样:处理蛋白样品(离心去除沉淀),冲洗Loop环后将样品注入,设置收集体积和收集水平。
- 分离与收集:执行开始分离命令,按设置收集样品。
- 结束:执行结束分离命令,关闭AKTApure和电脑。
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