Agilent 1200高效液相色谱仪的使用方法主要包括以下步骤:
一、开机准备
- 开启计算机,进入Windows系统;依次打开脱气机、泵、柱温箱、检测器等模块电源,等待各模块自检完成。
- 双击桌面“仪器1(联机)”图标,化学工作站与仪器通讯连接,进入操作界面。
二、流动相准备与排气
- 将已超声脱气的流动相(如甲醇、水等)放入溶剂瓶,打开泵的冲洗阀(逆时针旋转2-3圈)。
- 点击泵图标,设置流速为4-5ml/min,启动泵冲洗管路,直至溶剂瓶到泵入口无气泡;切换至其他需用通道(如B、C、D)重复排气。
- 关闭冲洗阀,设置正常流速(如1ml/min),检查柱前压力(稳定后一般低于100bar)。
三、参数设置与系统平衡
- 柱温箱:点击柱温箱图标,设置目标温度(如30℃),确保与色谱柱要求匹配。
- 检测器:打开检测器灯(如DAD检测器),观察基线稳定性,待基线平稳后准备进样。
- 方法编辑:通过“方法”菜单选择“编辑完整方法”,设置泵流速、溶剂比例(如A=20%水,B=80%甲醇)、梯度洗脱(如需)、进样体积(如5μl)等参数。
四、进样与数据采集
- 样品前处理后装入自动进样器,设置进样序列(含样品位置、体积等)。
- 点击“运行”开始分析,系统自动完成进样、分离、检测,数据实时存储于工作站。
五、关机步骤
- 分析结束后,用适当溶剂(如甲醇-水)冲洗色谱柱30分钟以上,避免盐类残留。
- 关闭检测器灯,将泵流速降至0,关闭泵、柱温箱等模块电源,最后关闭计算机。
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