AKTA蛋白纯化仪器的操作流程主要包括以下步骤：

1. 开机准备：打开仪器主电源和电脑电源，待仪器自检完毕（CU950指示灯完全点亮不闪烁），双击桌面UNICORN软件进入操作界面。
2. 溶液与样品处理：所有工作溶液和样品需经0.45μm滤膜过滤（样品也可高速离心取上清），含有机溶剂的缓冲液需超声脱气10min。
3. 清洗及管道准备：将A1（平衡液）、B1（洗脱液）管道放入对应溶液，通过软件“pump wash”功能清洗泵及管路，确保无气泡。
4. 安装层析柱：设置低流速（如1ml/min）和柱耐受压力（参考填料/柱说明书），待进样阀1号位流出液体后连接柱上端，卸下柱下端堵头接入检测器。
5. 开始纯化：待柱子平衡（电导、pH稳定）后，紫外调零；选择样品环上样（进样量≥环体积2倍）或泵上样（切换A1至样品，上样后换回平衡液）；设定洗脱梯度（如100%洗脱液10CV）和收集体积（如1ml/管）。
6. 清洗与关机：用纯水冲洗泵及管路，再用20%乙醇保存管路；拆卸层析柱时先堵下端再堵上端防气泡；退出软件后关闭主机和电脑电源。

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