AKTA蛋白纯化仪100的操作流程主要包括以下步骤:
- 开机与系统启动:打开主机和电脑电源,待仪器自检完毕(CU950上3个指示灯完全点亮不闪烁),双击桌面UNICORN图标进入操作界面。
- 准备流动相和样品:所有工作溶液和样品需经0.45μm滤膜过滤,样品也可高速离心取上清;含有机溶剂的缓冲液需低频超声脱气10分钟。
- 清洗管道及装柱:将A1管道放入平衡液、B1管道放入高盐溶液,通过system control窗口选择“manual→pump→pump wash basic”清洗管道;设置低流速(如1mL/min)和填料耐受压力(参考说明书),将柱子接入进样阀并连接紫外流动池。
- 手动运行:平衡柱子至电导及pH曲线稳定后,紫外调零;用样品环上样(进样量≥样品环体积2倍),切换进样阀至inject状态开始纯化。
- 结束处理:实验结束后,用水冲洗柱子,再用20%乙醇保存,拆除柱子避免气泡,关闭软件及电源。
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