安捷伦Seahorse细胞能量代谢分析仪的核心工作原理是通过实时监测活细胞的两种关键代谢指标——耗氧率（OCR）和胞外酸化率（ECAR），来评估线粒体呼吸和糖酵解这两大能量代谢途径的活性。具体来说，仪器采用专利瞬态微室技术，将探针板降至检测孔中形成小体积微室，通过无标记传感器检测培养基中溶解氧（反映OCR，线粒体呼吸的指标）和pH值（反映ECAR，糖酵解的指标）的变化，从而计算细胞代谢速率。实验过程中还可通过加药口依次注入多达4种化合物（如抑制剂、激动剂），实时观察细胞代谢响应。

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