Agilent 1260高效液相色谱仪流动相的选择需综合考虑以下要点：

1. 极性匹配：流动相极性应与待分离化合物极性匹配，极性化合物选极性流动相，非极性化合物选非极性流动相。
2. pH值控制：反相色谱中通常使用pH 2-7的缓冲溶液，弱酸样品可加50 mmol/L磷酸盐缓冲液+1%醋酸，弱碱样品可加50 mmol/L磷酸盐缓冲液+30 mmol/L三乙胺（去尾剂）。
3. 离子强度与缓冲能力：适当缓冲盐浓度可增强分离效果，减少色谱漂移，需使用新制备的缓冲盐溶液。
4. 流动相组成调整：遵循‘由强到弱’（先90%乙腈/甲醇-水体系试验）、‘三倍规则’（每减少10%有机溶剂，保留因子约增3倍）及‘粗调转微调’原则优化比例。
5. 溶剂要求：需色谱纯溶剂，避免长期放置变质（如四氢呋喃避光）；与检测器匹配（UV检测时溶剂截止波长需低于检测波长20nm以上）。
6. 前处理：流动相需用0.45μm（常规）或0.2μm（HPLC）滤膜过滤，超声波脱气10-15分钟；含缓冲盐时需用10%异丙醇水冲洗泵头防盐结晶。

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