Agilent 1260液相色谱仪的操作方法主要包括以下步骤：

一、开机准备

1. 配制流动相（需0.45μm滤膜过滤并超声脱气10-15分钟），无机相和有机相分别装入溶剂瓶（如A瓶固定放无机盐水相）；若流动相含缓冲盐，需以2-3滴/分钟速度虹吸10%异丙醇水冲洗seal-wash，防止盐结晶损坏泵头。
2. 打开计算机，依次开启液相各模块电源（真空脱气机、四元泵、自动进样器、检测器等），待自检完成后双击“仪器1联机”进入化学工作站。

二、排气操作

1. 旋开泵冲洗阀（逆时针约1圈），右键点击“泵”图标进入编辑界面，设置流速5ml/min、溶剂A 100%，启动泵冲洗至管线无气泡（约5分钟）；切换B/C/D通道重复冲洗。
2. 关闭冲洗阀（顺时针旋紧），逐步降低流速至方法所需值（如1ml/min），冲洗色谱柱20-30分钟至柱压稳定。

三、参数设置与数据采集

1. 编辑方法：从“方法”菜单选择“编辑完整方法”，设置泵流速、流动相比例、压力限值（建议≤250bar）；检测器波长（如254nm）、响应时间；柱温箱温度等。
2. 设置样品信息：输入操作者姓名、数据文件名，选择进样模式（标准进样或洗针后进样）。
3. 待基线平稳后，选择单针或序列进样，开始实验并记录数据。

四、关机与维护

1. 实验结束后，用甲醇/水（与流动相等比例）以0.5-1ml/min冲洗色谱柱20分钟，确保柱内充满有机相后关闭泵。
2. 退出工作站软件，关闭各模块电源及计算机。
3. 定期校准检测器、清洁进样针/溶剂滤头（污染可用30%-35%稀硝酸浸泡），避免藻类堵塞管路。

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