Agilent 1260高效液相色谱仪的操作流程主要包括以下步骤：

一、开机前准备

1. 流动相准备：使用色谱纯或分析纯以上溶剂，水相需现用现配（避免微生物滋生），所有流动相需经0.45μm滤膜过滤并脱气（超声或在线脱气10-15分钟）。
2. 环境与仪器检查：实验室温湿度需控制在15-30℃、湿度20%-80%；检查仪器各模块连接稳固，废液管路通畅，色谱柱及保护柱状态良好（无污染、损坏）。

二、开机与系统初始化

1. 依次打开计算机、检测器、柱温箱电源，待辅助模块自检完成后开启泵模块电源。
2. 启动ChemStation工作站，软件自动连接仪器模块并自检。

三、排气与平衡

1. 旋开泵冲洗阀（逆时针约1圈），设置流速5mL/min，依次对A、B、C、D通道溶剂排气（每通道约5分钟），直至管路无气泡。
2. 关闭冲洗阀（顺时针旋紧），逐步调整流速至0.5mL/min→0.8mL/min→目标流速（如1mL/min），冲洗色谱柱20-30分钟至压力稳定。

四、数据采集

1. 编辑方法：通过“方法→编辑完整方法”设置泵流速、流动相比例、柱温（15-40℃）、检测波长（如254nm）及停止时间等参数。
2. 进样设置：手动或自动进样（进样量根据方法设定），编辑样品信息（操作者、文件名等）。
3. 运行分析：待基线平稳后启动进样，实时监控色谱图。

五、关机

1. 分析完成后，用纯有机相（如甲醇）冲洗色谱柱30分钟以上，降低流速至0，关闭检测器灯。
2. 退出工作站，关闭仪器各模块电源及计算机。

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