Agilent 1260液相色谱仪的操作方法主要包括以下步骤：

一、开机准备与启动

1. 流动相准备：使用色谱级有机相（如甲醇、乙腈）和高纯水（如娃哈哈纯净水），水相应3天更换一次；流动相需经0.45μm滤膜过滤并超声脱气10-15分钟。
2. 系统检查：确认洗针液（色谱甲醇/乙腈）充足，废液瓶容量足够，管路无泄漏。
3. 开机操作：打开计算机并登录系统，依次开启液相各模块电源（泵、进样器、检测器、柱温箱），待自检完成后双击桌面“LC1260(Online)”进入联机界面。

二、排气与平衡

1. 旋开泵冲洗阀（逆时针约1圈），右键点击“Pump”图标，设置流速5ml/min、溶剂A为100%，启动冲洗至管路无气泡（约5分钟）；切换其他通道重复冲洗。
2. 关闭冲洗阀（顺时针旋紧），设置流速逐步升至方法所需值（如1ml/min），冲洗色谱柱20-30分钟至基线平稳。

三、参数设置与进样

1. 编辑方法：从“方法”菜单选择“编辑完整方法”，设置泵流速、流动相比例（如A=80%、B=20%）、压力限值（建议≤250bar）；检测器波长（如254nm）、响应时间（如0.1min）；柱温箱温度（与色谱柱要求匹配）。
2. 进样操作：样品经0.45μm滤膜过滤后，选择单针或序列进样，观察基线平稳后启动采集，记录保留时间、峰面积等数据。

四、关机与维护

1. 分析完成后，用甲醇/乙腈（1ml/min）冲洗色谱柱20-30分钟（含缓冲盐流动相需先用10%甲醇水过渡），降低流速至0，关闭检测器灯。
2. 退出工作站软件，关闭各模块电源及计算机，清洁进样针等耗材并妥善存放。

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