Agilent 1200高效液相色谱仪的操作方法主要包括以下步骤：

一、准备工作

1. 准备流动相：流动相需用0.45μm滤膜过滤并脱气（如超声10-15分钟），溶剂瓶需明确标识并更换新鲜纯净水（防长菌）。
2. 连接色谱柱：按色谱柱标示方向连接，避免装反；开启柱温箱。

二、开机与系统初始化

1. 依次打开脱气机、泵、检测器、柱温箱等模块电源，待自检完成后启动化学工作站（双击“仪器1联机”图标），与仪器通讯。

三、脱气与管路排气

1. 旋开泵的Purge阀（逆时针2-3圈），设置泵流速为5ml/min，依次对A、B、C、D通道以100%比例冲洗5分钟（脱气机内腔约12ml，需充分排气）。
2. 排气完成后关闭Purge阀（顺时针旋紧），调整流速至1ml/min，用10%甲醇水（或乙腈水）冲洗色谱柱30分钟平衡。

四、方法设置与数据采集

1. 编辑方法：在“方法和运行控制”界面设置泵参数（流速、流动相比例）、检测器波长（如DAD需存储全光谱）、进样体积（洗针方式推荐，洗针液为50%甲醇水）。
2. 样品设置：在样品信息界面填写样品名称、位置及保存路径，确认无误后启动。
3. 数据采集：待基线平稳（显示Ready），点击进样开始按钮，自动进样器完成进样并采集数据。

五、关机与维护

1. 关机前用90%水冲洗色谱柱0.5-1小时（流速0.5-1ml/min），再用100%有机溶剂冲洗0.5小时。
2. 关闭检测器灯、泵、柱温箱，退出工作站，关闭计算机及各模块电源。

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