Agilent 1200液相色谱仪的操作流程主要包括以下步骤：

一、准备工作

1. 准备流动相：将水相和有机相流动相用0.45μm滤膜过滤并超声脱气10-15分钟，装入溶剂瓶并标注，确保吸滤头浸入液面以下。
2. 检查仪器：确认废液瓶容量充足，连接色谱柱（注意方向，避免装反），开启柱温箱。

二、开机与排气

1. 依次打开计算机、脱气机、四元泵、柱温箱、检测器等模块电源，待各模块自检完成后，双击“HPLC 联机”进入化学工作站。
2. 打开泵的Purge阀（逆时针旋松），设置流速5ml/min，依次对各使用通道（如A、B）以100%比例排液5分钟（脱气机内腔约12ml，需充分排气）。
3. 排气完成后，将流速调至0，旋紧Purge阀（避免高压下操作），设置流速1ml/min，用10%甲醇水冲洗色谱柱30分钟。

三、方法设置与数据采集

1. 方法编辑：在“Method and Run Control”界面调用或新建方法，设置泵流速、流动相比例、柱温（室温以下10℃~100℃）、检测波长（紫外或DAD检测器）及进样体积（0.1~50μl）等参数。
2. 样品信息：在“样品视图”填写样品名称、位置、文件保存路径等信息，选择洗针方式（如50%甲醇水溶液洗针）。
3. 数据采集：待基线平稳后点击“平衡”回零，仪器显示“Ready”时启动进样，自动进样器完成样品注入并采集数据。

四、关机与维护

1. 数据结束后，用90%水相冲洗色谱柱0.5-1小时（流速0.5-1ml/min），再用100%有机溶剂冲洗0.5小时（避免盐析堵塞）。
2. 关闭检测器灯，退出工作站，关闭计算机及各模块电源，登记使用记录。

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