AKTA蛋白纯化仪器的操作流程主要包括以下步骤:
- 开机准备:打开AKTA设备电源,观察指示灯状态,确认泵同步(泵内应有液体注入声);
- 启动系统软件:打开电脑后双击Unicorn软件(如7.0或5.11版本),使用默认用户名(Default)和密码(default)登录,进入主操作界面System Control(核心操作窗口)、数据分析界面Evaluation及系统设置界面Administration;
- 洗泵操作:将A1泵头从20%乙醇中取出,用去离子水冲洗后放入分子筛缓冲液,在System Control界面通过Manual指令选择Pump A wash(指定A1流路)执行洗泵;
- 参数设置:根据“GE蛋白纯化柱表”设置柱压报警上限(System Pressure High Alarm),避免超压;同时设置系统流速(如1mL/min),确保不超过色谱柱最高限制;
- 连接色谱柱:断开进样阀与检测器间的管线,待进样阀出口流出液体后,连接色谱柱上端;柱下端去掉注射器并连接管线,待液体滴出后接入检测器接口;
- 运行实验:完成上述步骤后即可启动纯化实验,通过Evaluation界面实时监测数据。
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