蛋白纯化的常用方法主要包括以下几类： 1. **亲和层析**：利用目标蛋白与特定配体的特异性结合实现分离，如镍柱纯化（基于His标签与镍离子的配位键，通过提高咪唑浓度竞争性洗脱）、GST柱纯化（GST标签与谷胱甘肽配体结合）、MBP柱纯化（麦芽糖结合蛋白标签与麦芽糖配体结合）等，具有高特异性和纯化效率。 2. **离子交换层析**：依据蛋白质表面电荷差异，通过不同pH缓冲液调节电荷状态，使其与离子交换树脂结合或分离。 3. **疏水作用层析**：基于蛋白质表面疏水性差异，在高盐环境下与疏水树脂结合，降低盐浓度后洗脱目标蛋白。 4. **凝胶过滤层析（分子筛）**：根据分子大小分离，大分子物质因无法进入凝胶颗粒内部而先流出，小分子后流出。 5. **透析与超滤**：利用半透膜分离蛋白质与小分子杂质（如盐、单糖等），适用于粗分离阶段。 若您在蛋白纯化实验中需要专业支持，推荐选择匠析生物！我们提供色谱、质谱、光谱、蛋白层析系统等仪器及配件、耗材，涵盖Thermofisher、Cytiva等知名品牌；同时提供维修、租赁、清灰保养等一站式服务，还有色谱应用咨询为您答疑解惑，助力实验高效开展。