Agilent Seahorse细胞能量代谢分析仪的操作流程主要包括以下关键步骤：

一、实验前准备

1. 开机与软件连接：实验当天打开主机和电脑，同时启动Wave软件，确保仪器与软件处于“Connected”连接状态。
2. 探针板水化：96孔探针板需分两步水化——实验前一天用无菌水水化，实验当天弃去无菌水，更换37℃预热的校准液并放入无CO₂恒温箱孵育1小时；24孔探针板可一步水化，但建议手动排除气泡。

二、实验当天操作

1. 细胞接种：将贴壁细胞接种至Seahorse专用细胞培养板。
2. 背景校正孔设置：需设置无细胞的背景校正孔（其他操作与细胞孔一致），用于过滤温度、缓冲能力等干扰因素，确保数据准确性。
3. 药物加载：为保证加药成功，需水化整个探针板，并确保相同字母标注的加药孔体积一致（包括背景孔）。

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