Agilent液相色谱仪流动相的选择需综合考虑以下要点:
- 纯度与新鲜度:流动相应使用色谱纯试剂(如甲醇、乙腈),水相建议用新鲜超纯水(不超过2天),缓冲溶液需当天配制,避免长菌变质。
- 过滤与脱气:流动相使用前需用0.45μm或0.22μm滤膜过滤(区分水系膜和有机系膜),并通过超声脱气20分钟,防止气泡干扰泵和检测器。
- 溶剂性质:选择粘度低(<2cp)、对样品溶解度适宜的溶剂,避免柱头沉淀;同时需与检测器匹配(如紫外检测器需溶剂截止波长低于检测波长)。
- pH值控制:根据样品酸碱性调整,酸性样品(3≤pKa≤7)建议用低pH缓冲液(缓冲范围在pKa±1),碱性样品同理,以减少离子化影响分离效果。
- 有机相选择:常用甲醇、乙腈等,可通过调整比例优化分离度,强极性样品可尝试高水相比例的Stable Bond系列色谱柱。
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