Agilent 1200高效液相色谱仪的操作流程主要包括以下步骤:
一、准备工作
- 按实验方法要求准备流动相(如去离子水、有机溶剂),用0.45μm滤膜过滤并超声脱气15分钟,确保无颗粒杂质;
- 准备供试品及对照品溶液,同样用0.45μm滤膜过滤;
- 检查溶剂瓶吸滤头是否浸入液面,确认废液瓶容量充足;
- 安装色谱柱(注意方向),并根据需要设置柱温箱温度。
二、开机与排气
- 依次打开计算机、1200 HPLC各模块(脱气机、泵、进样器、柱温箱、检测器)电源;
- 待各模块自检完成后,双击工作站图标(如“仪器1联机”)进入化学工作站;
- 旋松泵的purge阀(逆时针转动),设置流速5.0ml/min,逐一将各流动相通道比例调至100%,运行泵排除管路气泡(每通道约5分钟),完成后关闭purge阀。
三、参数设置与运行
- 在工作站中设置流动相比例、流速、检测波长、柱温等实验参数;
- 平衡系统:以初始流动相比例运行30分钟以上,直至基线稳定;
- 进样:将样品装入自动进样器,设置进样体积,启动进样程序;
- 数据采集:运行样品后,工作站自动记录色谱图,完成后保存数据。
四、关机
- 用初始流动相冲洗色谱柱30分钟(梯度洗脱后需延长冲洗时间);
- 关闭检测器、柱温箱、泵电源;
- 关闭工作站及计算机;
- 填写仪器使用记录。
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