Agilent HPLC的操作流程主要包括以下步骤:
- 准备工作:选择色谱纯流动相(如水相需超纯水),用0.22μm滤膜过滤并超声脱气;检查仪器线路连接、废液瓶容量,明确实验所需色谱柱并确认方向。
- 开机:先打开HPLC各模块(泵、检测器、柱温箱等)电源,待自检完成后开启电脑,运行化学工作站软件(如双击“仪器1联机”图标),确保软件与仪器通讯正常。
- 排气:手动旋开泵冲洗阀(逆时针约1圈),通过软件执行“prime”操作排出泵内气泡,至无气泡后关闭冲洗阀。
- 参数设置:设置流动相比例(A/B/C/D相)、流速(通常0.5-1.5mL/min)、柱温(一般25-40℃)、检测波长等;平衡系统至基线平稳(约30分钟)。
- 进样分析:设置进样量、样品瓶号,将处理好的样品放入自动进样器,启动运行,软件自动采集数据。
- 关机:分析结束后,用纯甲醇(或实验要求的溶剂)冲洗色谱柱30分钟以上;关闭软件,依次关闭检测器、柱温箱、泵电源,最后关闭电脑。
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