Maurice 毛细管电泳分子量校准:3个容易忽略的细节
深度解析:
【故障表现】按照说明书做了分子量校准,但样品分离后R²达不到要求,分离度差,蛋白分子量偏差超过10%。
【原理分析】Maurice 的分子量分离基于筛分原理,影响迁移时间的核心因素是毛细管的有效长度和电渗流稳定性。进样时的电击穿效率、缓冲液pH偏差都会改变迁移时间,进而影响校准曲线的线性。
自查指南:
- 校准前必须用0.1M NaOH和纯水依次冲洗毛细管10分钟,活化管壁硅羟基,保证电渗流稳定。
- 进样电压和进样时间要和样品保持一致,进样量过大容易导致区带展宽,迁移时间偏移。
- 每次更换缓冲液后都要重新跑一遍校正标记,迁移时间偏差超过2%就要重新校准。
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