蛋白纯化过程中系统压力突然升高，流速下降，不仅影响纯化梯度，严重的话还会导致层析柱压碎，几天的纯化工作前功尽弃，让人非常头疼。

首先检查入口过滤器筛板，样品中的细胞碎片、沉淀很容易堵塞筛板，造成入水口压力升高。拆开过滤器取出筛板，用 0.5M 氢氧化钠反向冲洗，或者更换新的筛板。

然后检查层析柱，蛋白沉淀吸附在柱头会导致柱压升高。可以降低流速，用 2-3 倍柱体积的缓冲液低流速冲洗柱头，如果压力降不下来，需要打开柱头挖出被污染的顶层填料，重新补填平衡。

最后检查泵出口单向阀，缓冲液中的无机盐结晶卡在单向阀内，导致阀球无法正常闭合，系统压力波动同时伴随偏高。拆下单向阀，放入热水中超声 10 分钟，重新装回测试。

上个月苏州工业园区一家生物公司的 AKTA pure 压力异常，跑了两次层析柱压都持续升高，工程师上门排查发现是样品预处理不到位，入口筛板完全被细胞碎片堵塞，清理筛板并帮助优化样品过滤工艺后，系统压力恢复正常，后续纯化再也没出现类似问题。

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