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蛋白纯化做到一半突然压力报警,纯化柱堵了是小,样品报废才让人心疼。别急着拆柱子,按顺序排查效率最高。
首先摸进样管路有没有异常温度变化。如果样品中有聚集体或未过滤的细胞碎片,最先卡在进样口前的PEEK滤头。拧下来泡在20%乙醇里超声5分钟,装回去压力能降一半说明问题找到了。
第二步拆检混合器后端的在线滤器。ÄKTA pure系列在这个位置有个05微米滤膜,纯化含His标签蛋白时镍离子脱落的碎屑最容易堵这里。拆下滤器看颜色,变黄或变褐就该换了。
第三步看柱前适配器的密封圈。尤其处理高黏度样品后柱压不降反升,往往是残留样品干了之后把适配器缝隙糊死了。用纯水和20%乙醇交替冲洗,如果压力抖动缓解就是这里的问题。
苏州生物医药产业园一家公司用的ÄKTA pure 150,一个季度内报了三次高柱压警告,工程师排查发现都是进样管道预滤器和在线滤器堵塞导致的。换了备用滤器和清洗管路后,柱压从0.6MPa降到0.15MPa,一个纯化周期缩短了近40分钟。
匠析生物就在苏州工业园区腾飞创新园,ÄKTA全系列滤头、密封圈、管路套件本地现货,30分钟响应上门排查。纯化进度耽搁不起,选匠析生物,选专业保障。
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