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蛋白纯化仪不出峰,究竟哪里出了问题?

AKTA 6 浏览 68 赞同 2026-06-20

蛋白纯化仪做完一批样品结果紫外检测器上什么峰都看不到,上样几万的样品液体就这么白白流走了,实验员心态直接崩掉,但别急着拆柱换缓冲液,按下面三步走就能定位。

先检查紫外检测池是否被蛋白沉淀污染。长时间做亲和层析,洗脱下来的高浓度蛋白容易在检测池石英窗上形成蛋白膜,导致透光率下降,260nm和280nm信号一起消失。可以用1M NaOH以0.5mL/min低流速冲洗30分钟,再用纯水冲洗干净,如果信号恢复就是这里的问题。

再检查收集阀位置是否切到了废液位。AKTA系统的收集阀在方法结束时如果被意外设置到Waste位置,样品全部进了废液,检测器当然没有峰。手动切换到收集位置做一次手动进样测试,确认进样阀位置和软件设置一致。

最后排查泵是否吸空。缓冲液瓶里的液位太低,或者吸滤头被气泡堵住,泵实际没有抽到液体,系统只有空气在循环。卸下泵头出口管路,用注射器抽吸排气,确认每个泵头出口都有连续液流再重新连接。

上个月苏州生物医药产业园一家客户CDMO客户AKTA pure纯化His标签蛋白,上样后一直平线,自己折腾了半天以为柱子坏了。我们工程师30分钟内到达现场,拆检测池发现蛋白膜已经半透明,1M NaOH冲洗后260nm信号立即恢复,上样跑出了清晰的目的蛋白峰,客户当天就完成了纯化批次。

考虑到纯化仪停机会导致整个工艺开发延期,匠析生物总部就在苏州工业园区腾飞创新园,AKTA系列常用部件如检测池窗片、泵密封件、进样阀转子都是本地现货。我们的工程师承诺30分钟内响应,24小时内上门,提供完整的GMP标准维护报告。选择匠析生物,选择专业保障。

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