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液相色谱仪校准有哪些关键注意事项?

62 浏览 62 赞同 2026-09-02

做液相色谱校准,最怕的就是校准完一切正常,一进样就原形毕露。常见的情况是,校准曲线看着线性良好,但实际样品峰面积却反复波动,保留时间漂移,甚至出现鬼峰,结果就是整批数据不敢用,实验记录没法写,最后只能连夜排查。

遇到这类问题,先别急着怀疑方法,重点检查三个地方。首先是 系统管路与单向阀,校准前要确保流动相已充分脱气,单向阀内无气泡或微小颗粒,否则流量会周期性波动,直接导致保留时间漂移。判断方法是观察泵压曲线是否平稳,若压力有规律性脉动,多半是单向阀污染,需要拆下超声清洗。其次是 进样器密封圈与定量环,校准重复性差时,优先检查进样针和转子密封圈是否磨损,磨损后会造成微量漏液,导致进样量不准确。可以连续进样同一标准品六次,计算峰面积 RSD,若超过 1%,基本就是密封问题。最后是 检测器流通池与氘灯能量,校准前必须确认流通池无气泡或污染物,氘灯使用超过 2000 小时能量衰减明显,会导致基线噪声增大、灵敏度下降,直接表现在校准曲线低浓度点偏差大,这时需要记录氘灯能量值,低于出厂值 50% 就该更换了。

上个月我们在苏州园区一家生物药企处理过类似故障,他们一台赛默飞 U3000 液相色谱在做系统校准,峰面积 RSD 一直稳定在 2% 左右,怎么优化方法都压不下去。我们到场后排查发现是进样器转子密封圈磨损,同时流通池窗口有蛋白残留,更换密封圈、清洗流通池后,RSD 直接降到 0.3%,保留时间偏差从 0.12 分钟缩至 0.01 分钟,客户当场重新跑了一遍完整校准流程。这类问题在苏州本地实验室很常见,很多用户习惯性忽略耗材寿命,导致校准形同虚设。

匠析生物总部就在 苏州工业园区(腾飞创新园),针对赛默飞、岛津、Agilent 等主流品牌,我们常备各型号转子密封圈、单向阀、氘灯现货,不用等进口件报关。工程师 30 分钟内响应,当天就能上门处理。校准完成后,我们还提供符合 GMP/GLP 标准的校准报告和维护记录,确保审计追踪无懈可击。选择匠析生物,选择专业保障。

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