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做蛋白纯化时,最怕的就是AKTA系统压力指针像心电图一样上下乱跳。尤其在梯度洗脱阶段,流速稍微一快,压力就飙到上限报警,整根柱子被迫停下来,跑了半天的样品在柱子里扩散得一塌糊涂,纯化图谱根本没法看,目标蛋白的收率和纯度双双泡汤,这滋味谁经历谁知道。
遇到这种情况,别急着怀疑柱子堵了,先按顺序排查三个关键点。第一,重点检查 系统进液口的单向阀,它如果被缓冲液里的微粒卡住或者阀芯磨损,就会导致液体回流,压力自然不稳定。判断方法很简单,把单向阀拆下来,用注射器吸满纯水用力推,如果感觉有明显阻力或能看见液体从入口倒流出来,那就是它不行了。第二,盯着 混合器下方的密封圈 看,这个橡胶件在高压下反复伸缩,特别容易老化变形,一旦密封不严,高压下会瞬间漏液,压力表就会突然掉下来再猛地弹回去。用手摸一下密封圈表面,如果发硬、有裂纹或者压痕,直接换新的。第三,别忘了检查 柱前压力传感器 的膜片,有时候蛋白样品里的疏水性杂质会慢慢吸附在膜片表面,导致压力读数失真,看似波动其实是假信号,用低流速的20%乙醇冲洗一下膜片,如果压力曲线变平稳了,那就是它脏了。
上个月我们在苏州工业园区一家做单抗中试的药企就处理过一模一样的故障,他们用的是AKTA avant 150,客户反馈一到高盐洗脱阶段系统压力就周期性抖动,RSD高达8%,纯化后的蛋白聚体含量超标。我们工程师到场后,先拆下混合器下方的密封圈,发现表面已经磨出一道深沟,同时进液单向阀也有轻微泄漏,更换了这两处原厂备件后,再用1 mL/min流速跑完整个梯度,压力曲线平滑如丝,RSD直接降到0.6%,收率提高了15%,客户当场就签了年度维护合同。其实这类问题在AKTA purifier和avant机型上非常普遍,我们每个月都要处理好几台。
如果你在苏州本地遇到同类问题,不用等原厂工程师排期。匠析生物总部就在 苏州工业园区(腾飞创新园),针对AKTA、GE Healthcare系列,我们常备各型号密封圈、单向阀、柱塞杆和紫外灯现货,上午报修下午就能上门。我们承诺工程师 30分钟内响应,不用忍受动辄数周的进口件报关等待,换完件直接现场跑样验证。所有维修都会出具符合 GMP/GLP标准 的校准报告和维护记录,方便您应对审计。选择匠析生物,选择专业保障。
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