在苏州工业园区做蛋白纯化的实验室里，AKTA 系统压力曲线突然飙升是最让人头疼的场景——柱压从正常的 0.3 MPa 几分钟内冲到 1.5 MPa 以上，系统自动报警停机，正在跑的梯度洗脱直接中断，几毫克纯化到一半的目的蛋白连同整根层析柱一起报废，一天的实验节奏全被打乱。

遇到这种情况，先别急着拆柱子。第一，检查在线滤器和柱头滤网，如果滤网表面发黄发堵，多半是样品前处理不干净，离心或 0.22 μm 过滤没做到位，颗粒物把滤网糊住了，拆下超声清洗或直接换新即可。第二，观察层析柱柱床是否压实或干裂，柱床一旦出现裂纹，样品走液不均，局部阻力骤增，压力自然上来，此时需要重新装柱或更换柱床。第三，排查系统泵单向阀和管路接头，单向阀内若卡入填料碎屑会导致流量不稳、压力波动，用 20% 乙醇反向冲洗或更换单向阀常能解决。

上个月我们在苏州工业园区一家生物药企就处理过类似故障。一台 AKTA pure 在跑 His 标签蛋白镍柱纯化时柱压从 0.35 MPa 骤升至 1.4 MPa，我们现场拆检发现柱头滤网被菌体碎片堵塞，同时单向阀内有一粒填料碎屑。清洗滤网、更换单向阀后重新平衡，柱压回落至 0.32 MPa，压力波动从 ±12% 降到 ±0.5%，当晚该批次蛋白顺利收样，纯度达 95% 以上。

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