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在苏州做 Agilent 1260/1100 液相的老师最怕看到的,就是序列跑着跑着峰面积忽高忽低,进样重复性 RSD 从 0.5% 一路飘到 3% 以上,标准曲线直接作废,一批样品全部重跑。这种情况多半出在进样系统和流路密封上,而不是检测器本身。
先看 进样针与针座。针尖长期扎针座会磨损或轻微弯曲,密封面贴合不严,进样量就会忽多忽少,拆下针观察针尖有无毛刺、针座密封面有无划痕,是最直接的判断。再看 计量泵与密封圈,密封圈老化后吸液回程会有微渗漏,表现为低浓度样品峰面积偏低且重复性差,可用纯水做称重法验证实际进样体积。第三处是 六通阀转子密封,转子磨损或残留结晶会造成切换时部分样品流失,做几次空针进样看是否有鬼峰或残留峰,能快速锁定问题。
上个月我们在苏州一家生物药企就处理过类似故障,一台 Agilent 1260 的进样 RSD 实测 2.8%,客户已经准备报废整批单抗样品。拆检发现针座密封面磨损、计量泵密封圈硬化,更换原厂密封件并做进样体积校准后,RSD 降到 0.3%,连续 6 针峰面积偏差控制在 0.5% 以内,当天恢复放行检测。
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