GE AKTA avant 25 跑梯度洗脱时紫外基线突然漂移、电导率曲线出现不规则的鬼峰，方法运行到一半系统压力报警停机，纯化中的单抗样品只能作废重来，这在蛋白纯化实验室里是最让人崩溃的场景。

遇到这类故障，先查 紫外流通池 是否被气泡或样品残留污染，观察基线噪声是否随流速升高而增大，用 0.1M NaOH 冲洗后若噪声不降，基本可判定池体脏污或氘灯能量衰减。其次检查 入口单向阀，AKTA avant 的 A/B 泵头单向阀若被缓冲液结晶卡住，会导致流速脉动、梯度不准，表现为电导率曲线滞后或台阶异常，拆下阀芯超声清洗往往能恢复。第三要核对 混合器 与 pH 电极，混合器堵塞会造成梯度延迟体积变化，pH 电极老化则让洗脱条件判断失真，用标准液校准若斜率低于 90% 就需更换。

上个月我们在苏州工业园区一家生物药企处理过类似故障，一台 AKTA avant 25 纯化单抗时电导率波动达 12%，梯度重复性 RSD 超过 2%，排查后确认是 B 泵单向阀 结晶卡滞加 混合器 轻微堵塞，更换阀芯并超声清洗混合器后，电导率偏差降到 0.5%，RSD 稳定在 0.3% 以内，当天就恢复了纯化。

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