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UPLC 本来就是高压系统,但 ACQUITY 压力逼近 15kpsi 触发起保护停泵时,说明流路出现了硬堵塞,梯度还没走完序列就中断,2.1mm 内径的色谱柱和昂贵样品都可能跟着报废。
关键是分段把压力源锁定。在线过滤器与预柱 是嫌疑最大的一段,拆下流动相入口的 PEEK 在线过滤器 冲洗、单独走水看基压,能立刻区分堵塞在仪器侧还是色谱柱侧;其次查 色谱柱入口,UPLC 柱前端筛板被样品基质(尤其蛋白、血浆)堵死时压力呈渐进式攀升,反冲柱效虽有风险但要凭数据决策;再往后查 柱塞杆密封圈 与 单向阀,磨损颗粒进入泵头也会在低压端制造异常,同时回忆方法参数——梯度起点 盐浓度过高或流动相未充分过滤,同样是压力飙升的常见推手。
上个月我们在苏州一家生物制药企业处理一台 ACQUITY UPLC:跑血浆样品时压力从 8kpsi 逐步升到 14kpsi 报警,拆开发现 在线过滤器 滤片发褐、色谱柱入口筛板 被脂质堵塞,更换滤片、按规程反冲并加装保护柱后,压力回到 0.4kpsi(纯水基线)与 8kpsi(方法运行)的正常区间,序列当日恢复。
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