AKTA pure 150 的 Pressure high limit 报警最消耗耐心：抗体样品已经挂到泵里，流速刚拉到 15 mL/min，压力从 2 MPa 一路窜到 8 MPa 设限，系统直接卸压停机，那瓶 300 mg 的澄清上清只能重新过一遍 0.22 μm 滤膜，而培养收率是有上限的。很多人第一反应是层析柱坏了，直接换柱，压力照样报警，一天就在试错里过完。

判断要先把系统侧和柱侧切开：断开 柱前接头，接上零体积接头让泵只走水，正常流速下系统压力应远低于 1 MPa；若这时仍然憋压，问题在仪器内部，重点查 入口过滤头与保护柱，蛋白样品里的脂类和聚集体会先沉积在这里，堵塞时压力随累计体积缓慢爬升而不是瞬时跳变；若断柱后压力正常，就回到柱侧，检查 柱适配器 是否被压到填料层面，以及自动收集管路有没有被压扁。还有一种容易被忽略的情况：压力传感器 自身漂移，表现为静态时读数不为零或梯度段出现无规律毛刺，用一台便携标准压力表并联比对，2 分钟内就能定论。

上个月我们在苏州一家抗体 CDMO 处理 pure 150 M 的报警，断柱后系统侧压力 0.3 MPa 正常，柱前压差却高达 7.9 MPa，说明堵点在柱头筛板。反冲层析柱、更换保护柱并调整上样前的稀释比例后，工作压力回到 2.4 MPa，Protein A 的动态载量恢复至 42 mg/mL，同一批抗体当天完成三个循环纯化，没有损失批次。

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