梯度跑到洗脱段突然弹出压力上限警告并停止进样，序列里剩下十几个样品全部悬空——用 Agilent 1100/1200 平台的实验室对这句报警都不陌生。多数人第一反应是色谱柱堵了，直接换柱，结果压力照旧、方法验证又浪费一天。

正确的顺序是从低压侧往检测器逐段隔离。先卸下保护柱与色谱柱，只留管路空跑：如果压力仍超限，问题在泵头或单向阀；含缓冲盐的流动相长期使用后，阀体内壁会析盐并让阀珠回位不畅，表现为周期性爬压。若空跑正常，再回头查柱路与在线滤器，滤板被颗粒半堵时压差可从 30 bar 升到 200 bar 以上，很容易误判为泵故障。

第二关键点是比例阀，也就是常说的主动阀。它的阀芯密封磨损后混合比失准，压力波动伴随基线漂移，用纯甲醇做 0% 到 100% 的陡梯度即可看到明显台阶。判断依据是压力曲线的形态：阀件问题多为高频小幅抖动，堵塞则为持续单向爬升。

上个月我们在苏州一家做仿制药一致性评价的企业处理过一台 1260：运行 40 分钟后报压力限、序列中断。现场拆解清洗单向阀、更换柱塞杆密封件与在线滤器，并对比例阀做密封性复位，之后重跑 60 分钟梯度，压力稳定在 178 bar 上下，波动不超过 3 bar，噪声由 0.6 mAU 降到 0.04 mAU。

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