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目前,国内外常用于测定多糖相对分子质量的方法有:渗透压法、蒸汽压法、凝胶色谱法、粘度法、光散射法和超滤法等。传统的大部分检测方法需要已知相对分子质量的标准品做比对。
由于不同多糖的结构不一致,采用标准品比对法,得到的多糖相对分子质量仅仅只能作为一种参考,而不是该多糖的绝对分子量,这样会往往造成采用不同方法测得的相对分子质量不一致。
多角度激光光散射系统能有效的解决了这一问题,其系统包括∶体积排阻色谱柱、多角度激光散射仪和示差检测器。激光信号与多糖样品的分子量和浓度呈正比,示差信号与样品的浓度呈正比,根据两者数据的运算可以得到多糖的绝对分子量。
聚合物和低分子量化合物不同,没有一个固定的分子量,而是不同分子量同系物的混合体系。因此聚合物分子量是一个平均值,有一个分布的概念。这种分子量的不均一性,称作聚合物的多分散性。高聚物试样的多分散性通常采用多分散系数α来表征,多分散系数是重均分子量与数均分子量的比值或者Z均分子量与重均分子量的比值,常用的技术有GPC-RI、GPC-RI-MALS等。
1.1服务内容
1) 将多糖溶解于合适的溶剂
2) 选择合适的分离柱
3) 选择合适的流速
4) 利用GPC-RI-MALS分析样品
5) 分析实验数据
1.2服务说明
1) 要求客户自行纯化,一般需过柱纯化,有条件的可以透析
2) 样品纯度直接影响分子量分布结果,纯度越高,数据准确度越高
3) 客户有特殊要求需提前与我们联系,公司默认采用公司提供的方法
4) 由于生物实验的不确定性,对于公司操作无误但结果与客户预期不符的,如果客户无正当理由,公司将正常收取全部费用
1.3反馈客户信息
1) 完整的实验方法、原始实验记录、仪器参数、试剂耗材信息
2) 处理好的,可直接用于发表的数据结果
3) 相应的售后技术支持
1.4实验周期
实验周期20-25天(如需加急,需提前沟通好)
2.1技术优势
1)稳定性好,同批次样品RSD<5%
2)检测指标齐全,涵盖多个方向
3)服务周到,提供售前咨询、售后技术支持
2.2注意事项
1)测试方法默认为公司常用方法,如果客户需要自己提供检测方法或者采用国标法,请提前告知
2)需严格按照送样要求备样、取样和送样
● 样品类型
纯化多糖
● 生物学重复
建议3次生物学重复
● 样品需求量
多于10 mg
● 样品准备
1)取样前需要设定好对照组、实验组,每组建议3次以上生物学重复
2)要求客户自行纯化,一般需过柱纯化,有条件的可以透析
3)样品纯度直接影响分子量分布结果,纯度越高,数据准确度越高
● 保存和运输
1)干样:根据样本性质常温或者低温运输
2)液体:需要冰袋或者干冰运输
● 样品标记要求
1)双标记,寄样管、寄样袋均写清楚样品编号
2)样本命名尽量避免简单的A/B/C或者1/2/3,建议采用字母加数字编号,避免重复
●其他
《样品技术需求表》请填写完整,且随样品一起邮寄
1)绝对分子量分析
注:
红线:多角度激光光散射信号
蓝线:示差信号
黑线:由两种信号拟合出的分子量
2)平均分子量
注:
Mn: kinetics studies and stoichiometric calculations.
(数均分子量:是动力学研究和化学计量计算所需的)
Mw: tensile strength
(重均分子量:反应拉力、抗冲击力)
Mz: flex life (ability of a polymer material to bend many times before breaking)
(z均分子量:反应挠曲寿命(聚合物材料在断裂前多次弯曲的能力))
3)分散系数
注:
Mw/Mn and Mz/Mn : polydispersity or polydispersity index, a measure of the broadness of the molar mass distribution
(Mw / Mn和Mz/Mn:多分散性或多分散指数,是分子量分布宽度指数)
4)旋转半径分析
5)分子构型分析
注:
以log(Molar Mass)为横坐标,以log(R.M.S. Radius)为纵坐标:
1)直线斜率小于或等于0.33,表明高分子在溶液中是一个紧密均匀的球形构象
2)直线斜率在 0.5~0.6 之间,表明高分子在溶液中呈无规则线团构象
3)直线斜率等于1,表明高分子在溶液中是一个棒状构象