Agilent Seahorse细胞能量代谢分析仪的核心工作原理是通过实时检测活细胞的两项关键代谢指标——耗氧率（OCR，反映线粒体呼吸）和细胞外酸化率（ECAR，反映糖酵解），来分析细胞能量代谢状态。其技术要点包括：仪器通过固态传感器探针在微孔板单层细胞上方约200μm处形成‘瞬时微室’，每隔5-8分钟采集极少量（约2μL）培养基，测定溶解氧和游离质子浓度的快速变化，进而计算OCR和ECAR。结合自动加药系统（如加入寡霉素抑制ATP合酶、FCCP解偶联电子传递、抗霉素A阻断电子传递链等），可评估细胞对底物、抑制剂的即时反应，分析线粒体功能（如基础呼吸、质子渗漏、最大呼吸等）及糖酵解状态。

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