蛋白纯化仪AKTA的操作流程主要包括以下步骤： 1. **准备与检查**：使用前检查硬件连接（USB线、电源线、废液管），确认各部件正常；所有缓冲液、样品需经0.22-0.45μm滤膜过滤，缓冲液需超声脱气。 2. **开机与软件启动**：先开AKTA主机电源，待指示灯稳定后启动电脑，打开UNICORN软件并登录（默认用户/密码），进入系统控制界面。 3. **泵与管路清洗**：将A/B泵进液管放入纯水或平衡液，通过软件执行“Pump Wash”功能清洗泵头及管路，避免气泡残留。 4. **安装层析柱**：设置低流速（如1.0mL/min），待管路出液后连接层析柱（先接柱头，后接柱尾），注意拧紧前排尽气泡；根据柱子/填料耐受压力设置报警压力（通常≤0.3MPa）。 5. **平衡柱子**：切换至目标缓冲液（如平衡液），以设定流速平衡柱子至电导、pH基线稳定（约2-3个柱体积）。 6. **上样与洗脱**：样品过滤后，通过上样环或泵上样；上样后继续用平衡液冲洗至基线平稳，再切换洗脱缓冲液（如高盐或梯度洗脱），设置收集参数（每管体积）收集目标蛋白峰。 7. **系统清洗与保存**：纯化结束后，用纯水冲洗泵、管路及柱子至基线平稳；长期不用时，换20%乙醇冲洗并保存系统，防止微生物滋生。 8. **关机**：退出UNICORN软件，关闭主机电源及电脑。 若您在使用AKTA等蛋白层析系统时遇到仪器维护、耗材更换或技术问题，可联系匠析生物！我们专注提供实验仪器（涵盖Thermofisher、Cytiva等品牌）、耗材、备件及售后维修维保整体解决方案，包括色谱、蛋白层析系统等仪器的清灰保养、故障维修、租赁服务，还有专业的色谱应用咨询，助力您的实验高效开展。